Bakterievækst i vand: forsøg med pladespredning

At bestemme bakterieantallet i en vandprøve ved hjælp af pladespredning

Teori:

En enkelt mikroorganisme er vanskelig at iagttage og undersøge, men hvis den fa?r de rette vækstbetingelser, vil den pa? relativt kort tid formere sig og blive til millioner af individer. En enkelt bakterie eller en anden mikroorganisme kan altså danne en koloni, som vil vokse frem pa? et passende fast substrat. Til fremstilling af et sådant substrat benyttes oftest et gelatineagtigt stof, agar, blandet med passende næringsstoffer. En fast næringsagar kan smeltes ved opvarmning i en mikrobølgeovn eller i et vandbad. Den smeltede agar hældes i petriska?le eller reagensglas. Mikroorganismer kan vokse og formere sig pa? agaren, når den igen er størknet. Bakterierne deler sig, når de har næring nok og dyrkes, inkuberes, ved en passende temperatur. Dette vil resultere i, at en bakterie deler sig til en hel koloni af bakterier, som kan ses med det blotte øje. En enkelt bakterie, som har formeret sig og dannet så mange bakterier, at de kan ses som en lille plet på agarpladen, kaldes en CFU (“colony forming unit”). Antallet af bakterier i prøven sættes lig med antallet af CFU’er. Antal bakterier pr. mL i en prøve bestemmes ved at tælle antal CFU og evt. gange med fortyndingen. Bestemmelsen af bakterieantallet i en prøve bliver mest præcist, hvis der er mellem 30 og 300 CFU på pladen.