DNA sekventering: Sanger-metoden

Besvar følgende spørgsmål; har I brug for hjælp kan følgende animation måske være god: https://highered.mheducation.com/sites/9834092339/student_view0/chapter18/sanger_sequencing.html

Hvad kan man bruge sekventeringsmetoden til?

Bestemme baserækkefølgen og dermed hvad generne koder for

Hvorfor skal DNA opvarmes i starten af processen?

For at adskille de to strenge - fra dobbeltstrenget til enkeltstrenget (hydrogenbindingerne brydes) ligesom en lynlås

Hvad er DNA-polymerase og hvilke reaktion katalyserer den?

DNA-polymerase er et enzym, der katalysere den proces, som binder nukleotider sammen, så de passer til skabelonstrengen

Hvorfor skal der anvendes en primer?

Primære er små enkeltstrengede DNA-stykker der er konstrueret, så de baseparrer i 3'-enden af den ene DNA-streng der skal fungere som skabelon

Skal bruge fri OH gruppe som den kan binde sig til

Ved sekventeringen skal primerne også bruges i begyndelsen, så DNA-polymerasen har noget at binde nukleotiderne til.

Hvad er den kemiske forskel på et deoxynukleotid og et dideoxynukleotid? Hvordan anvendes denne forskel i sekventeringsmetoden?

Mangler et oxygenatom ved ‘tre’ - så det bare er H i stedet for HO

Gør brug af den fluorescerende evne

Hvad er den grønne cirkel på figur 162?

Den del der giver den fluorescerende farve

Forklar, hvordan man finder DNA sekvensen ved denne metode.

Det ønskede dobbeltstrengede DNA skal gøres enkeltstrenget ved opvarmning