Gerningsstedets gåde: DNA-analyse med PCR og gelelektroforese

Formålet ved PCR er at fremstille er større mængde af et stykke DNA. Og formålet ved gel elektroforese er at adskille DNA stykkerne efterstørrelse.

Teori

PCR

PCR står for Polymerase Chain Reaction og bliver brugt til at multiplicere DNA. Man multiplicere DNA`et for, at få mere af det samme DNA. PCR foregår i et lukket apparat, hvor man har det ønskede DNA, frie nucleotider, Varme stabilt DNA polymerase og primer i et reagensglas .

Man starter med at opvarme blandingen til 90 grader. Ved de 90 grader brydes hyrdrogenbindingerne mellem DNA strengene(1). Derefter bliver temperaturen sænket til 60 grader og primerne sætter sig på hver sin ende af de to enkeltstrenge. Primer fungerer som startssekvens for dannelsen af en ny DNA eller RNA streng. DNA polymerasen sætter sig på de frie nucleotider(2). DNA polymerase er et enzym, som for de frie nucleotider til at sætte sig på resten af de to enkeltstrenge og danner to nye dobbeltstrenget DNA stykker.

Temperaturen hæves igen til 90 grader og de to nye dobbeltstrenget DNA brydes ind til fire enkeltstrenge(3). Temperaturen sænkes igen til 60 grader og primeren vil sætte sig i enden på hver af de enkeltstrenge. Polymerasen sætter sig på de frie nucleotider(4) og danner fire nye dobbelstrenget DNA stykker(5). Denne metode bliver gentaget og for hver cyklus bliver antallet af DNA stykker fordoblet.