Gensplejsning: transformation af bakterier med GFP

Formålet er at transformere bakterier med et gen, der koder for Grønt Fluorescerende Protein. Genet stammer oprindeligt fra den bioluminiscerende gople Aequorea victoria. Grønt Fluorescerende Protein får goplen til at fluorescere og lyse i mørket. Ved at følge proceduren for transformation kan bakterierne udtrykke det nyerhvervede gen fra goplen og producere det fluorescerende protein, der får dem til at lyse med en skinnende grøn farve under en UV-lampe.

Hypotese:

Vi forventer at se en reaktion på den agar plade hvor plasmidet indeholder ampicillin og arabinose.

Pladen der indeholder ampicillin og LB medium og DNA har også egenskaberne til at lyse grønt, men da der ikke er arabinose til stede vil dette ikke ske, i stedet vil der derfor forekomme lyse pletter på agar pladen som kan ses i dagslyset.

På de andre plader vil der ikke ske noget.

Her er det illustreret i et skema:

LB

LB/Amp

LB/Amp/Ara

+ DNA forventet

-

Svage lyse pletter*

Bliver selvlysende

+DNA observeret

-

-

-

-DNA forventet

-

-

-

-DNA observeret

-

-

-

* svage lyse pletter i dagslys.

Materialer:

(Til hver enkel gruppe)

1 LB-plade med bakteriekolonier på

Agarplader (1 LB, 2 LB/amp og 1 LB/amp/ara)

LB-medium (vækstmedium) grøn

Transformationsopløsning lilla