DNA-analyse og gel-elektroforese

DNA-analyse. Undersøgelse af DNA vha. gel-elektroforese

Formål: At undersøge hvilke personer, der har bestemte udgaver af gener

Indledning: Det er vigtigt at forstå hvordan man kan udføre og forstå Dna-analyse. Man skal kunne vide hvilken ladning DNA har, og man skal også kunne vide hvad DNA er opbygget af.

Materialer:

Buffer:0,1g NaCl opløst i 1000 mL H2O. (Almindeligt ledningsvand kan anvendes)

Gel: l % agar (Bacto-agar). 35 mL er nok til et lille elektroforesekar

Opløsninger: 33 masse% Sakkarose

Pipetter: Mikropipetter, så der kan afsættes 10 ?L prøve i hver brønd

Strømforsyning: DC-volt strømforsyning, der kan give 100V (tilsluttes af læreren)

Elektroforesekar

Andet:10 ml reagensglas med propper til opbevaring af prøver (i mørke).

Papirvarer: Sort karton, overhead-plastik, blå og gule tuscher.

Fremgangsmåde:

Opvarm agarblandingen i mikrobølgeovn. Gør elektroforesekammeret tæt ved at sprøjte flydende agar langs kanterne. Når kammeret er tæt støbes gelen ved, at der hældes flydende agar ned i kammeret, hvori, der sidder en kam. Vent nu til agaren er størknet. Hæld buffer ovenpå gelen, der skal være 2.-3 mm over gelen. Kammen, der danner brøndene i gelen, må ikke fjernes, før bufferen er hældt over gelen. Herved undgår man, at der kommer luftlommer i brøndene, når kammen fjernes. Puffervæsken skal stå 2-3 mm over gelen.