A: Formålet ved at lave en Polymerase Chain Reaction er at mange doubler DNA’et som man har til rådighed efter isoleringen. Det er nødvendigt at man har en opformering fordi at mange andre metoder og teknikker ikke er præcise og følsomme nok til kun at arbejde med nogle få DNA-stykker, de kræver simpelthen en større DNA masse for at kunne være præcise.
Når man har et DNA og ønsker at opformere det, er der typisk under 1000 nukleotider i DNA-strengen. Når man skal lave en opformering af DNA-et så skal man kende basesekvensen for de første 20 i hver ende. Det skal man fordi enzymet i DNA-polymerasen der indtager den centrale rolle i PCR teknikken, den fungere kun hvis den hjulpet i gang af primet, som består af små enkeltstrengede DNA-molekyler.
Primere er komplementære til begge ender i DNA-området, man gerne vil have opformeret. De primere har deres egen specifike nukleotid-sekvens der fremstilles kunstigt. Hvis man har et DNA-stykke der er ukendt og gerne vil opformere, så kan man klister et stykke kendt DNA, på hver ende af det ukendte DNA. Så er det nemlig muligt at designe det rette DNA og rette primere til det kendte DNA. Når man så har gjort DNA’et enkeltstrenget (denatureres ved 95 grader) kan man med en hurtig nedkøling til 50-65 grader binde primere til deres komplementære sekvenser i det enkeltstrengede DNA-stykke.
Det er gratis at oprette en konto