Vækstforsøg med bakteriekulturer

1) Gør rede for en metode til bestemmelse af antallet af bakterier i et vækstforsøg som ovennævnte

Spektrofotometri: For at bestemme væksten af bakterier i en flydende kultur ved metoden spektrofotometri - altså ved at måle absorbansen af lyset i et spektrofotometer. Desto flere celler der er, desto mere uigennemsigtig bliver bakteriekulturen. Bakterierne absorberer ikke lys, men lyset spredes, når det rammer dem. Hvis der er mange bakterier vil lyset altså spredes meget og hvis der er lidt vil det næsten ikke spredes. I en helt klar prøve uden celler vil bsorbansen være 0. I en prøve med rigtigt mange bakterier vil absorbans være større end to, hvor kun 1% af lyset vil trænge igennem. Pladespredning: En anden metode, som man kan benytte for at bestemme væksten af bakterier er ved metoden pladespredning. Den går ud på, at man gror bakterierne fra prøven på agarplader (en petriskål med næringssubstrat) ved den rette temperatur. Her gror bakterierne og danner kolonier. Efter et tidsrum er det muligt med det blotte øje at se og tælle bakteriekolonierne (CFU -colony forming unit). Ved optælling af CFU'er er det altså muligt at finde ud af, hvor mange bakterier, der er i prøven. Når man benytter pladespredning, fortynder man ofte bakteriekulturen. Antallet af bakteriekolonier skal altså ganges med fortyningsfaktoren. Hvis man vil have et sikkert resultat til bestemmelse af antallet af bakterier i et vækstforsøg, kan man benytte både spektrofotometri og pladespredning og sammenligne resultaterne.