FormålFormålet med dette forsøg er at isolere DNA fra løgceller.
TeoriDNA står for deoxyribonukleinacid, som er et molekyle, bestående af to lange kæder, der snor sig om hinanden. Hos eukaryote celler ligger DNA-tråde, kaldet kromosomer, i cellekernen og er omgivet af kernemembranen. Hos prokaryote celler er DNA ringformet og flyder frit i cytoplasmaet. Løgceller, som alle andre planteceller, hører under de eukaryote celler, dvs. at kromosomerne er omringet af en kernemembran. Udover celle- og kernemembran, har planteceller har også cellevæg, og det skal man tage højde for, når man vil isolere DNA.
Princippet i metoden er, at man først mekanisk nedbryder vævet for at adskille cellerne fra hinanden. Derefter nedbryder man cellevægge, cellemembraner og kernemembraner med et vaskemiddel, som også kaldes et detergent. De andre cellefragmenter adskilles ved filtration, mens DNA og opløselige proteiner forbliver i den frafiltrerede væske. Med enzymet protease fjerner man proteinerne, og endelig udfældes DNA i iskold ethanol.
Materialer
Til fremstilling af løg ekstrakt:
Blender
Skarp grønsagskniv og spækbræt
Vandbad, 60 °C
Isbad
Termometer
2 stk. 250 ml bægerglas
Kaffefilter
100 g løg (brug et stort løg, oftest polyploider)
10 ml vaskemiddel (af den billige ikke-koncentrerede slags)
3 g NaCl
100 ml destilleret vand
Mikroskop
Til at adskille DNA fra løg ekstraktet:
Det er gratis at oprette en konto