DNA analyse: Gentest for Huntingtons chorea ved hjælp af PCR og gel elektroforese
Resumé
”Formålet med dette forsøg er, kort fortalt, at udføre en gentest for Huntingtons chorea, som er en sjælden og alvorlig sygdom, som rammer hjernen. Denne gentest har vi udført ved hjælp af PCR og gelelektroforese til at frembringe resultatet. ”
Indledning
”Der kendes en række forholdsvis almindelige genetiske sygdomme, der skyldes genmutationer. Huntingtons chorea er sådan et eksempel og genmutationen består i at en kort DNA sekvens er blevet duplikeret for mange gange i HTT-genet på kromosom 4.
Genmutationen kan påvises vha. PCR og efterfølgende gel elektroforese af PCR produkterne. Man har fremstillet primere, som sætter sig på HTT-genet. Hvis mutationen er til stede bliver PCR produktet 440 nukleotider langt. Hvis mutationen ikke er til stede, og genet er rask bliver PCR produktet kun 420 nukleotider langt. ”
Teori:
”Man plukker gener i arvematerialet, når man foretager sig en gentest. En gentest bruges bl.a. til at undersøge mutationer og sygdomme. PCR er en af de måder man benytte sig af når man foretager sig en gentest. Teknikken for PCR bliver udført i mange trin. Det allerførste trin går ud på at bryde hydrogenbindingerne, da de holder de 2 DNA-strenge sammen. Bindingerne bliver brudt da de bliver opvarmet til 90 grader. Når de er det, sænker vi temperaturen til omkring 40-60 grader, som gør det muligt for primerne at blive tilføjet. Primeren er kunstigt frembragte DNA-fragmenter. De fungere som en sekundær form for gentest til gelelektroforese. I denne teknik tager man en persons DNA og lægger det i gelen i det elektriske spændingsfelt. Det elektriske spændingsfelt vil skubbe de forskellige fragmenter, afhængig af hvilken ladning de har, mod en pol som er i spændingsfeltet. Ud fra fragmenterne opstår der nogle nye bånd, som bliver afgørende for om der er en sygdom eller om patienten er rask. ”
Det er gratis at oprette en konto