Isolering af DNA fra celler er første trin i mange molekylærbiologiske undersøgelser. Fremgangsmåden er en meget generel metode og kan anvendes på mange celletyper, der indeholder en vis mængde DNA.
Materialer:
Kniv og spækbræt
Vandbad 60° C
Stavblender (morter)
Isbad
Bægerglas
Kaffefilter
ca. 100 g løg
10 mL opvaskemiddel
3 g NaCl (bordsalt)
100 mL demineraliseret vand
9 mL iskold 96 % ethanol
Fremstilling af løgekstrakt:
Tilsæt 3 g NaCl til opvaskemidlet. Fyld på til 100 mL med demineraliseret vand.
Skær løget i små stykker, kantlængde ca. 5 mm. Hæld løgstykkerne i et bægerglas, og overhæld dem med vaskemiddel/saltopløsningen.
Rør i blandingen, og stil den i et 60° C varmt vandbad i præcis 15 minutter
Køl blandingen ned på et isbad i 5 minutter. Husk jævnligt at røre i blandingen.
Blend blandingen med stavblenderen i 5 sek. ved høj hastighed. Alternativt kan blandingen knuses godt i en morter
Filter løgopløsningen ned i et bægerglas gennem et kaffefilter. Undgå at få skum med ned i filtratet. Filtratet indeholder nu opløselige proteiner og DNA.
Adskillelse af DNA fra løg-ekstraktet:
Hæld ca. 5 mL løg-ekstrakt i et reagensglas.
Tilsæt 10 mL iskold 96 % ethanol til løg-ekstraktet ved at hælde ethanolen forsigtigt ned langs reagensglassets side. Ethanolen må ikke blandes med løg-ekstraktet, men skal lægge sig i et lag oven på løg-ekstraktet. Lad reagensglasset stå uforstyrret i 2-3 minutter.
Det er gratis at oprette en konto