Isolering af DNA fra kiwi

Forsøg nr. 1 – Isolering af DNA fra kiwi

Formål:

At isolere DNA fra kiwi.

Materialer og sikkerhed:

1 kiwi

Skrap og skærebræt

250 mL bægerglas

Glasspatel

10 mL opvaskemiddel – ikke koncentreret

3,03 g NaCl

Ca. 100 mL vand

Vandbad 60o

Isbad 0o (kar med koldt vand og isterninger)

Stavblender

Tragt med filterpapir

500 mL konisk kolbe

Stort reagensglas med stativ

10 mL måleglas

Engangspipette

6 mL kiwi-opløsning

3 dråber protease, f.eks. Neutrase fra Novosymes

9 mL iskold 96% ethanol direkte fra fryseren

Glasspatel eller anden tynd stav

Fremgangsmåde og sikkerhed:

Skræl en kiwi og skær den i små stykker på ca. 0,5 x 0,5 cm.

I et 250 mL bægerglas blandes 10 mL opvaskemiddel med 3 gram NaCl og fyldes op med vand til 100 mL. Kiwi tilsættes og blandes.

Blandingen sættes i 60o varmt vandbad i præcis 15 minutter. Blanding omrøreres undervejs.

Blanding sættes derefter i 0o isbad i 3 minutter.

Blanding tages ud af isbadet og blendes ved høj hastighed i 5 sekunder.

Blandingen hældes i en tragt med et filter, hvor væsken med opløst kiwi DNA drypper ned i kolben.

6 mL filtreret kiwi DNA hældes i et stort reagensglas og der tilsættes 3 mL protease. Dette omrøreres med en glasspatel.