Enzymkinetik: Undersøgelse af catecholase

ENZYMKENITIK

Indhold

Formål………………………………………………. 3

Teori………………………………………………… 3

Materiale……………………………………………. 9

Fremgangsmåde…………………………………… 9

Resultat og Databehandling………………………… 10

Enzymkinetik

Formål

I dette forsøg undersøges enzymkinetikken for catecholase. Desuden undersøger vi den hæmmende virkning af phenylthiocarbamid.

Teori

I denne øvelse skal vi arbejde med enzymet catecholase (også kaldet catecholoxidase eller polyphenoloxidase). Enzymet forekommer almindeligt i planterceller i små vesikler og kan udvindes fra f. eks. frisk kartoffelsaft. Enzymet er en del af plantens forsvarssystem. Enzymets substrater er catechol (også kaldet pyrocatechol eller 1,2-dihydroxybenzen) og dioxygen fra luften. Produktet er o-benzoequinon. Ligevægten er forskudt helt mod højre.

2

+ O2

2

Substraterne er farveløse, mens o-benzoequinon har en gulbrun farve, som kan måles med et spektrofotometer.

Enzymkinetik

Enzymkinetik er en undersøgelse af kemiske reaktioner, der katalyseres af enzymer. Alle levende organismer afhænger af kemiske reaktioner, som sker automatisk af sig selv meget langsomt. Enzymer er katalysatorer, der reducerer den nødvendige aktivering energi så reaktioner foregå ved en hastighed, der er nyttige til cellen. De stoffer som reagerer på hedder substrater.

I en reaktion, vil substratet binde sig til enzymet for at formere et produkt. Disse hedder enzym-katalyserede reaktioner, men enzymerne er ikke forbrugt i selve reaktionerne, men bliver frigivet ved slutningen af reaktionen for at genbruges. Hvert enzym har et aktivsted, hvor reaktionerne finder sted. Når substratet binder sig til aktivstedet, kan enzymet ændre bekræftelse. Efter substrat-enzym-komplekset er dannet, kan de kemiske reaktioner forekomme yderligere som derefter tillader produkterne at danne.