Oxidation af ethanol med alkoholdehydrogenase

Formålet er at studere oxidationen af ethanol med dioxygen under anvendelse af enzymet, alkoholdehydrogenase.

Teori:

Ved forsigtig oxidation af ethanol med dioxygen dannes ethanal. Reaktionen forløber kun såfremt der samtidig anvendes en egnet katalysator. Det kan være metallisk kobber eller – hvad der er tilfældet i den menneskelige organisme – enzymet alkoholdehydrogenase.

Enzymet findes i mange andre organismer bl.a gærceller. Derfor anvender vi almindeligt bagegær som kilde til enzymet i dette forsøg.

Dannelsen af ethanal kan pævises ved at anvende stoffet 2,4-dinitrophenylhydrazin. Da ethanal giver bundfald med en opløsning af 2,a-dinitrophenylhydrazinopløsning.

Forbruget af dioxygen kan påvises ved anvendelse af methylenblåt. Dette stof har en kraftig blå farve, når det er opløst i en væske, hvori der samtidig er opløst dioxygen i væsken er stoffet derimod farveløst.

Apparatur:

Reagensglas

Måleglas, 25 mL. (3 stk.) og 100 mL. (2 stk.)

Konisk kolbe, 250 mL.

Prop med hul til konisk kolbe

Vinkelbøjet rør

Vaskeflaske

Vandstrålepumpe

Gummislange

Bægerglas

Kemikalier:

Ethanol, (5 %)

Gærsuspension i vand (GS), 10 g tørgær pr. 1 L vand

Methylenblåt (MB), 0,01 %

2,4-dinitrophenylhydrazinopløsning

Udførelse:

Delforsøg A

Bland 50 mL. ethanol og 50 mL: GS i vaskeflaske.

Bobl atmosfærisk luft gennem blandingen i cirka en ½ time ved hjælp at vandstrålepumpen. I ventetiden udføres delforsøg B.