Amylases enzymaktivitet: temperatur- og pH-afhængighed

Temperatur og pH afhængighed for amylases enzymaktivitet

Formål

Denne øvelse har formålet at måle ?-amylases enzymaktivitet samt at bestemme dennes afhængighed af temperatur og pH.

Teori

Enzymer er katalysatorer som findes overalt i naturen. Alle enzymer er specifikke dvs. at hvert enkelt enzym kun katalyserer en bestemt biokemisk reaktion, uden at de selv bliver forbrugt i situation. Disse enzymer gør at cellen fungerer, da de kan sørge for, at processerne forløber med en tilstrækkelig hastighed, der gør at en celle kan have et stofskifte. Ved kemiske reaktioner vil et substrat bindes til enzymet, sådan så at den kemiske reaktion kan finde sted. Enzymer er betydeligt sårbare over for ændringer i fysiske-kemiske forhold, f.eks. ved en ændring af pH og temperatur. Ideal temperaturen for et enzym ligger ved omkring de 37°C, og hvis der kommer temperaturer som er tilstrækkeligt over ideal-temperaturen vil enzymet, pga. proteinets struktur denatureres, altså det vil ændres irreversibelt. Dette vil sige, at selvom det bliver kølet ned igen til en optimal temperatur, vil enzymet ikke kunne bruges. Enzymet som vi har at gøre med i vores forsøg er ?-amylase.

Amylase er det enzym, som hydrolyserer glycosidbindinger i polysaccharider, f.eks. stivelse der består af amylose og amylopektin. Vi har at gøre med ?-amylase, som er en endoamylase dvs. at den hydrolyserer ?-(1,4)-glykosidbindinger inde i stivelsesmolekylerne. Ved en hydrolyse skal termerne maltose og isomaltose forstås.